引言
香烟是满足人生理嗜好的重要消费品,是世界各国消费最广的产品之一。虽然,大量的研究、报道、社会舆论、甚至法令法规,宣传吸烟有害健康,倡导戒烟禁烟,但一方面烟草收益是国家财政的重要部分,尤其是发展中国家;另一方面更重要的原因是,烟毒尼古丁使吸烟者对香烟产生强烈依赖性“烟瘾”,难以戒烟。香烟燃烧的烟雾中含有3800多种化合物,其中包括尼古丁及其代谢产物可的宁在内的有毒有害物质达几百种,有“烟瘾”者长期吸烟,对主动和被动吸烟人群和公共卫生造成极大危害。由此可见,在无法完全禁止吸烟的现状下,缓解尼古丁和可的宁的危害,不仅直接降低吸入尼古丁的危害,而且可以缓解“烟瘾”,减少吸烟量,间接降低吸烟危害。
茶是世界重要的保健饮品之一,我国是茶的故乡,普洱茶是云南省历史悠久的地方名茶,有降低血脂、减肥、抑菌、助消化、醒酒等多种保健功效。然而迄今为止,没有有关普洱茶缓解香烟烟毒危害的报道。本文通过建立小鼠被动吸烟模型,首次研究普洱茶对缓解烟毒危害的作用。
1 材料和方法
1.1 试验动物
本文设计的2个试验选择体重18~20g健康成年昆明种雄性小白鼠。发育正常,无畸形,无外伤,皮肤无感染。为满足本试验要求,检查所有试验小鼠眼睛瞳孔清晰,无白内障、角膜损伤、眼睑无发炎和红肿;鼻无粘液物流出;口腔无流涎、出血;耳无外伤;步态无异常,反应灵敏,不迟钝、不亢进等。
1.2试验材料
1.2.1 被动吸烟室 自制的小鼠被动吸烟室为一个密封玻璃箱(100 cm × 50cm × 50 cm),安装供氧管,供氧量2 L/min,供应正常饮食和饮水。使用云南省红河卷烟厂生产的“红河”牌香烟。
1.2.2 普洱茶提取液 云南勐海县华洋茶业有限责任公司提供的2005年生产的“樟味”普洱茶(熟茶)。普洱茶提取液制备过程如下:取普洱茶40g,加蒸馏水 800 ml浸泡lh,90℃水浴提取lh,过滤后保存滤液,将残渣加蒸馏水800 nl,90℃水浴提取lh,过滤保存滤液,残渣加400 ml蒸馏水,90℃再提取40 min过滤。合并以上三次滤液,用旋转蒸发仪浓缩至400ml,-20℃冷冻保存,临用前晚常温解冻。
1.2.3 香烟 云南省红河卷烟厂生产的“红河”牌香烟
1.3 试验方法
两个连续试验于2006年9月至2006年12月完成,试验及指标测定在云南省动物营养与饲料重点实验室完成。
试验一:小鼠被动吸烟模型的建立
试验一设5个处理组,每组10只小鼠,分别放置于5个被动吸烟室,每个箱中点燃3只香烟。处理组1~5的吸烟时间设定为:10、20、40、60、80 min。观察小鼠行为,以确定适合的被动吸烟时间,建立被动吸烟模型。
试验二:被动吸烟小鼠灌服普洱茶缓解烟毒的研究
试验二设计3个处理组:空白组、试验I组和Ⅱ组。每组60只小鼠,每组6笼,每笼10只。空白组不吸烟、不灌服普洱茶;试验I组吸烟、不灌服普洱茶;试验Ⅱ组吸烟、灌服普洱茶。小鼠日粮营养水平:粗蛋白23.7%、粗脂肪5.1%、粗纤维4.5%、粗灰分7.3%。
试验组I和Ⅱ小鼠置入被动吸烟室,上午(9:00)、下午(15:OO)各1次,每次60min。每天空白组灌服0.9%生理盐水1ml;试验I组不灌服普洱茶,灌服0.9%生理盐水1ml;试验Ⅱ组灌服普洱茶1ml,灌服在上午10:30进行。试验周期42天,d 7、14、21、28、35、42下午16:30,用摘眼球法采集小鼠血样,制备血清检测尼古丁和可的宁浓度。
1.4 检测指标
气相色谱法测定血清尼古丁和可的宁浓度,标样可的宁出峰时间9.042s、尼古丁出峰时间14.578s。
1.5 数据统计
试验二包括处理和时间两个效应。三个处理组间血液尼古丁和可的宁浓度指标先用单因素(处理效应)方差分析和邓肯氏多重比较进行统计,然后试验I组与试验Ⅱ 组间进行T-test对比检验。使用一般线性模型(general linear model,GLM)对不时间点(时间效应)血液尼古丁和可的宁浓度进行一次线性和二次曲线正交分析所有统计显著性表示在P<=0.05。
2 结果
2.1 小鼠被动吸烟模型的建立
在自制的被动吸烟室给烟条件下,分别观察连续被动吸烟10~80 min的小鼠行为(表1)。试验结果显示,10 min内小鼠活动活泼正常;20 min时,小鼠有被动吸烟应激现象,表现急躁,有跳出笼子的倾向;60 min,小鼠活动迟缓、呆滞,有初步中毒现象;80 min,10只小鼠中5只中毒晕厥,其余小鼠不能正常活动。
表1 小鼠被动吸烟后的行为
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