本研究采用经典的遗传毒理学试验方法：小鼠骨髓微核率试验、小鼠精子畸形分析试验，鼠伤寒沙门氏杆菌回复突变试验、仓鼠肺成纤维细胞(CHL)染色体畸变试验， 以晒青毛茶为对照，对不同贮藏年份的共5种代表性普洱茶产品进行了遗传毒性安全性毒理学评价，以检测其是否具有潜在的致突变和致癌毒性。​

材料与方法

1.1 茶叶原料​

为了研究普洱茶代表性产品的安全性，本研究选取了不同厂家，不同贮藏年份和不同包装形式的五个普洱茶样品作为研究对象，分别编号为：A、B、C、E、F，并选取了大叶种烘青绿茶作为对照。（如表）​

1.2 试验动物

体重为18－22克昆明种(KM)小白鼠。​

1.3 实验菌株

鼠沙门氏伤寒杆菌突变株 TA97、TA98、 TA100 、TA102。​

1.4 试验细胞株

中国仓鼠肺纤维细胞(CHL)株V79。​

试验方法​

茶样常规成分分析方法

茶叶水浸出物：全量法；茶多酚总量测定：酒石酸铁比色法；咖啡碱含量：紫外分光光度法；茶叶水分含量的测定：恒重法。​

除此之外，还用了小白鼠急性毒性试验方法、小白鼠骨髓微核试验方法、小白鼠精子畸形试验方法、Ames 试验方法、仓鼠肺成纤维细胞(CHL)染色体畸变试验。   ​

结果与分析​

茶样常规成分分析结果(如表)​

化学分析法是食品毒理学评价的重要手段，普洱茶生化成分的分析研究已有较多的报道，本试验选检以上几个项目，以对所试茶样的情况作简要界定。检测结果表明所选茶样的常规成分具有较好的代表性。​

各茶样小白鼠(KM)急性毒性试验结果

各茶样的半致死剂量(LD50)的计算, 急性毒性试验中LD50的计算有多种方法，本试验采用Bliss法统计软件对各茶样的急性毒性实验结果进行统计分析，其结果如下：

六个茶样的急性毒性统计结果分析(如表)

急性毒性试验是指动物一日内单次或多次(在24小时内分2～3次给药)给药后，在7天或14天中，连续观察动物所产生的毒性反应及死亡情况，从定性和定量两方面进行观察毒性反应的方法。从毒理学角度来看，任何物质都有毒性，人或动物摄入任何物质达到一定剂量都可能致死。文献报道[171]，大鼠口服蒸馏水LD50为469±51 mL Kg-1，从表6可以看出，五个普洱茶样品的LD50分别为：9.7g/kg、11.2g/kg、12.2g/kg、11.8g/kg、12.4g/kg，烘青绿茶样的LD50为7.5g/kg，表明普洱茶样的急性毒性比烘青绿茶样还低，并发现六个样品的一次灌胃量在5g/kg体重以下时喂养观察十四天没有动物死亡，低于1/2LD50的灌胃剂量灌胃后多数动物表现出神经兴奋症状；随着灌胃剂量加大，动物在十分钟后出现神经抑制症状。五个普洱茶样的急性致死时间只有一个高峰期，而烘青绿茶则有两个死亡高峰期，分析认为普洱茶引起动物死亡以及由烘青绿茶引起的第一死亡高峰是由过高浓度的咖啡碱所致，而烘青绿茶样D引起第二个动物死亡高峰则可能与过高浓度的茶多酚有关；根据WHO1977年颁布的毒性标准，六个茶样的 LD50均大于5000 mg/kg体重，可判定为实际无毒。

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